基因工程畢業(yè)論文開題報告

　　開題報告是對學生位論文選題工作的論證和審核，是高校生培養(yǎng)與管理的重要環(huán)節(jié)，下面是小編搜集整理的基因工程畢業(yè)論文開題報告，歡迎閱讀查看。

　　論文(設計)題目：農(nóng)桿菌介導的西瓜NPR1基因遺傳轉(zhuǎn)化

　　選題的意義：

　　西瓜為葫蘆科植物，是夏季重要水果。近年來，西瓜生產(chǎn)中病毒感染嚴重，影響產(chǎn)量和品質(zhì)。化學農(nóng)藥防治存在農(nóng)藥殘留問題，所造成的環(huán)境問題日益嚴重突出。因此選用生物工程技術選育抗病毒的良種已經(jīng)成為當務之急，植物基因工程為抗病育種提供了新途徑。

　　研究的主要內(nèi)容：

　　1、 查閱收集文獻資料，熟悉相關研究內(nèi)容。

　　2、 制訂出研究方案、實驗方法。

　　3、對西瓜種子進行浸染、共培養(yǎng)的時間的測定;

　　4、開展不定牙分化、不定根生根的轉(zhuǎn)化率的測量;

　　5、試驗在分化過程中不同激素濃度對分化過程的影響，并確定最佳濃度;

　　6、試驗在分化過程中不同Hy篩選濃度對分化過程的影響，并確定其最佳濃度;

　　7、對實驗數(shù)據(jù)、結果做出分析、總結。

　　研究綜述(前人的研究現(xiàn)狀及進展情況)：

　　1992年Serrano等用農(nóng)桿菌介導法將hlaI基因轉(zhuǎn)入西瓜,轉(zhuǎn)化的西瓜在離體狀態(tài)下對Nacl產(chǎn)生較高抗性。

　　1991—1997年黃學森、彭學賢、萬莉、王慧中等，將WMV的外殼蛋白基因?qū)�入西瓜植株，獲得抗性材料，并獲農(nóng)業(yè)部批準進行安全釋放試驗。

　　1997年肖光輝等采用DNA浸胚法，將外源 瓜DNA導入西瓜，變異株的生長勢明顯增強，而對照西瓜葉部病害較重。

　　1998年Chen-Shaw Chen等通過花粉管途徑將抗鐮刀枯萎并基因?qū)�入西瓜轉(zhuǎn)化植株表現(xiàn)出枯萎的抗性。

　　1998年到2003年，中國農(nóng)業(yè)大學生物技術國家實驗室、新加坡國立大學、山西金鼎種業(yè)公司合作，將WMV CP基因、ZYMV復制酶基因、CMV復制酶基因通過農(nóng)桿菌介導，成功導入西瓜植株，經(jīng)溫室及大田抗病毒鑒定表明：其抗性達到中抗以上水平。

　　但尚未見有關農(nóng)桿菌介導法將NPR1基因轉(zhuǎn)入西瓜的報道。

　　擬采用的研究方法、步驟：

　　一 、方法：農(nóng)桿菌介導法

　　二、步驟：

　　1、 外植體(西瓜子葉)的獲得;

　　2、 農(nóng)桿菌菌葉浸染子夜，置MS+6—BA1.0mg/L培養(yǎng)基、暗箱共培養(yǎng)2—3天;

　　3、 無菌水清洗4次后，無菌紙吸干，置MS+6—BA1.0mg/L + Cef 100mg/L+Hy培養(yǎng)基上誘導叢生牙的分化;

　　4、 轉(zhuǎn)化牙轉(zhuǎn)入MS+6—BA+IBA+Cef +Hy培養(yǎng)基中成苗;

　　5、 轉(zhuǎn)2.0CM高的苗于MS+6—BA+IBA+NAA1.0mg/L+Cef +Hy培養(yǎng)基中生根;

　　6、 將已生根的無菌苗移致花盆中，一個月后轉(zhuǎn)入大田;

　　7、 PCR檢測。

　　研究工作進度安排：

　　20XX年12月份 誘導子葉叢生牙的分化;

　　20XX年1月到2月 成苗、生根;基本掌握PCR檢測技術;

　　20XX年3月到4月 移栽、DNA提取、PCR檢測、統(tǒng)計和分析實驗數(shù)據(jù)，完成畢業(yè)論文初稿;

　　20XX年5月份 畢業(yè)論文定稿。

　　參考文獻目錄：

　　[1] 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化獲得轉(zhuǎn)基因西瓜植株，浙江大學學報，2000年;

　　[2] 葫蘆科作物轉(zhuǎn)基因研究進展，細胞生物學雜志，2002年;

　　[3] 西瓜轉(zhuǎn)基因抗病毒病新材料 BH—1，2004年。

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